زائر
طريقة تعيين نسبة الكرياتينين فى الدم
طريقة تعيين نسبة الكرياتينين فى الدم ( Jaffe eatin)
تعتمد هذه الطريقة اللونية( Jaffe eatin) على تفاعل الكرياتينين (الموجود فى السيرم أو البول) مع حمض البكريك القلوى(Akain Pii Aid ) فيعطى لون برنقالى محمر0
العينات المستخدمة
Samps )
يمكن قياس الكرياتينين فى البلازما أو السيرم أوالبول (بشرط تجميع بول 24 ساعة للشخص المراد قياس الكرياتينين له)
أولا تقدير نسبة الكرياتينين فى الدم : Sem eatinine
نأخذ من الشخص عينة دم وريدى توضع فى أنبوبة سنتر فييوج وتترك حتى تتجلط ثم تدار فى جهاز السنتر فيوج لفصل السيرم أو نستخدم مانع تجلط للحصول على البلازما (فى هذا الأختبار لا يشترط مانع تجلط معين)
فصل البروتين :- Deptenizatin
تأتى خطوة فصل البروتين عن السيرم أو البلازما بواسطة مرسب البروتين(حامض ثلاثى كلوريد الخليك .T. . A ) وهى كالآتى :
نأخذ فى أنبوبة سنتر فيوج 1 مللتر من السيرم أو البلازما يضاف اليها 1 مللتر من مرسب البروتين (.T. . A ) ثم نرج جيدا نلاحظ تعكرمحتوى الأنبوبة بعد عملية الخلط تدار الأمبوبة فى جهاز السنتر فيوج ( الطرد المركزى) لفصل البروتين ونحصل من هذه العملية على المحلول الرئقSpenatant الذى يتم تقدير الكرياتينين فيه 0
المحاليل المستخدمة :- eagents
1- المحلول القياسى تركيز : eatinine standad 2.0mgd
T S B
1m -- -- المحلول الرائق Spenatant -- 0.5m -- المحلول القياسى Standad -- -- 0.5m ماء مقطر Dist.Wate -- 0.5m 0.5m .T. .A 1m 1m 1m البكريك القلوى wking stin Mix, et stand f exaty20 mintes at 20- 25 ċ. 2- حمض البكريك : ( eagent)
3 - هيدروكسيد الصوديوم : (Akaine eagent)
يتم خلط المحلول 2 و 3 للحصول محلول البكريك القلوى (wking stin) الذى يستخدم فى الإختبارمباشرتا 0
طريقة عمل الاختبار :-
نقوم بتحضير ثلاثة أنابيب نظيفة جافة ونميزها بالرموز B S T
- الأنبوبة Bوهى الخاصة بمحلول البلانك - الأنبوبة Sوهى الخاصة بالمحلول القياسى - الأنبوبة Tوهى الخاصة بعينة الأختبار
ثم نقوم بتنفيذ الجدول الموضح فى الأنابيب بأن نضع 1مللتر من المحلول الرئق فى أمبوبة العينة (T) نضع 5ر0 مللتر من المحلول القياسى فى أمبوبة (S) نضع 5ر0 مللتر من الماء المقطر فى أمبوبة (B) نضع 5ر0 مللتر من ( .T..A) فى كل من أمبوبة(ٍ S و B ) & نضع 1 مللتر من محلول البكريك القلوى فى الثلاث أنابيب 0 (يجب أن يكون مجموع حجم المحاليل فى الثلاث أنابيب يكون متساوى)
نترك الأنابيب مدة 20 دقيقة قبل عملية القراءة ثم يضبط جهاز قياس الألوان عند طول موجة ( 546 nm ) ثم يضبط صفر الجهاز على محلول البلانك (B) ثم نأخذ قراءة أمبوبة المحلول القياسى (S) و قراءة أمبوبة العينة (T) تسجل القراءة 0
الحساب :- aatin
نسبة الكرياتينين فى البلازما =
قراءة العينة
× 2 قراءة المحلول القياسى
مثال : إذا كانت قراة أمبوبة العينة 6ر0 وقراءة أمبوبة المحلول القياسى 4ر1 أحسب تركيزالكرياتينين فى العينة ؟
طريقة تعيين نسبة الكرياتينين فى الدم ( Jaffe eatin)
تعتمد هذه الطريقة اللونية( Jaffe eatin) على تفاعل الكرياتينين (الموجود فى السيرم أو البول) مع حمض البكريك القلوى(Akain Pii Aid ) فيعطى لون برنقالى محمر0
العينات المستخدمة
Samps ) يمكن قياس الكرياتينين فى البلازما أو السيرم أوالبول (بشرط تجميع بول 24 ساعة للشخص المراد قياس الكرياتينين له)
أولا تقدير نسبة الكرياتينين فى الدم : Sem eatinine
نأخذ من الشخص عينة دم وريدى توضع فى أنبوبة سنتر فييوج وتترك حتى تتجلط ثم تدار فى جهاز السنتر فيوج لفصل السيرم أو نستخدم مانع تجلط للحصول على البلازما (فى هذا الأختبار لا يشترط مانع تجلط معين)
فصل البروتين :- Deptenizatin
تأتى خطوة فصل البروتين عن السيرم أو البلازما بواسطة مرسب البروتين(حامض ثلاثى كلوريد الخليك .T. . A ) وهى كالآتى :
نأخذ فى أنبوبة سنتر فيوج 1 مللتر من السيرم أو البلازما يضاف اليها 1 مللتر من مرسب البروتين (.T. . A ) ثم نرج جيدا نلاحظ تعكرمحتوى الأنبوبة بعد عملية الخلط تدار الأمبوبة فى جهاز السنتر فيوج ( الطرد المركزى) لفصل البروتين ونحصل من هذه العملية على المحلول الرئقSpenatant الذى يتم تقدير الكرياتينين فيه 0
المحاليل المستخدمة :- eagents
1- المحلول القياسى تركيز : eatinine standad 2.0mgd
T S B
1m -- -- المحلول الرائق Spenatant -- 0.5m -- المحلول القياسى Standad -- -- 0.5m ماء مقطر Dist.Wate -- 0.5m 0.5m .T. .A 1m 1m 1m البكريك القلوى wking stin Mix, et stand f exaty20 mintes at 20- 25 ċ. 2- حمض البكريك : ( eagent)
3 - هيدروكسيد الصوديوم : (Akaine eagent)
يتم خلط المحلول 2 و 3 للحصول محلول البكريك القلوى (wking stin) الذى يستخدم فى الإختبارمباشرتا 0
طريقة عمل الاختبار :-
نقوم بتحضير ثلاثة أنابيب نظيفة جافة ونميزها بالرموز B S T
- الأنبوبة Bوهى الخاصة بمحلول البلانك - الأنبوبة Sوهى الخاصة بالمحلول القياسى - الأنبوبة Tوهى الخاصة بعينة الأختبار
ثم نقوم بتنفيذ الجدول الموضح فى الأنابيب بأن نضع 1مللتر من المحلول الرئق فى أمبوبة العينة (T) نضع 5ر0 مللتر من المحلول القياسى فى أمبوبة (S) نضع 5ر0 مللتر من الماء المقطر فى أمبوبة (B) نضع 5ر0 مللتر من ( .T..A) فى كل من أمبوبة(ٍ S و B ) & نضع 1 مللتر من محلول البكريك القلوى فى الثلاث أنابيب 0 (يجب أن يكون مجموع حجم المحاليل فى الثلاث أنابيب يكون متساوى)
نترك الأنابيب مدة 20 دقيقة قبل عملية القراءة ثم يضبط جهاز قياس الألوان عند طول موجة ( 546 nm ) ثم يضبط صفر الجهاز على محلول البلانك (B) ثم نأخذ قراءة أمبوبة المحلول القياسى (S) و قراءة أمبوبة العينة (T) تسجل القراءة 0
الحساب :- aatin
نسبة الكرياتينين فى البلازما =
قراءة العينة
× 2 قراءة المحلول القياسى
مثال : إذا كانت قراة أمبوبة العينة 6ر0 وقراءة أمبوبة المحلول القياسى 4ر1 أحسب تركيزالكرياتينين فى العينة ؟